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關鍵字:超聲波細胞破碎儀、粘度計、金屬浴、組織研磨儀

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美國SONICS超聲波處理器

美國SONICS 超聲波石墨烯分散儀剝離機 VCX 500
美國SONICS 超聲波石墨烯分散儀剝離機 VCX 500

超聲波石墨烯分散儀 VCX500,可安全處理各種有機和無機材料,從250微升升至1升*。典型應用包括納米技術(生產納米顆粒材料和石墨烯分散體),細胞裂解,樣品制備,均質化,ChIP測定,乳化,解聚和解聚,以及聲化學液體處理領域的應用。

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超聲波石墨烯分散儀 VCX500,可安全處理各種有機和無機材料,從250微升升至1升*。典型應用包括納米技術(生產納米顆粒材料,石墨烯分散體,剝離),細胞裂解,樣品制備,均質化,ChIP測定,乳化,解聚和解聚,以及聲化學液體處理領域的應用。





◆能量監視器

◆集成溫度控制器防止樣品過熱,監測并控制樣品處理溫度在1℃至100℃范圍內

◆數字電表

◆基于微處理器和可編程

◆10小時流程計時器

◆獨立開/關脈沖發生器

◆可變功率輸出控制

實驗目的

1、了解超聲細胞破碎的基本原理

2、掌握超聲細胞破碎的基本技術

實驗原理

強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關,空化現象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。

材料和試劑

細菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球。

探頭型號大小破碎細胞容量
2mm150ul-5ml
3mm200ul-10ml
6mm10ml-50ml
10mm50ml-250ml
13mm200ml-1000ml



型號
VCX 500
頻率
20KHz
功率
500W
標配變幅桿
Φ13mm
標配變幅桿處理量
50ml至250ml
標配變幅桿長度
136mm
變幅桿整體尺寸
235 x 190 x 340 mm
變幅桿材質
鈦合金Ti-6Al-4V
可選變幅桿
Φ13mm,Φ19mm,Φ25mm
變幅桿重量
900g
變幅桿電纜長度
1.8m
破碎容量
50-1000ml
占空比
1-99%
功率調節范圍
連續可調(20-500w)
間隙時間
0.1-99.9s
溫度保護設定
有,能量和溫度設定點控制(溫度探頭需加配)
功率振幅顯示

工作頻率范圍
能量監視器數字式瓦特計自動調諧自動振幅補償
工作時間
基于微處理器的-可編程的10小時計時器1 - 59秒獨立于/關閉脈沖
超聲時間
從1秒到10小時
工作模式
間隙/連續
電源
220/110V 50Hz/60Hz或者 除非有其他要求,否則電要求以117V、50/60Hz發送
凈重
6.8kg
主機+換能器重量
3680g



超聲波發生器一臺
隔音箱選購
工具箱第88 - 00041轉換器和一個紅色的扳手
工具箱第88 - 00026和一個藍色扳手
電源線一根
溫度探頭不銹鋼材料(可選附件),編號830-00060
專用破碎杯選購
使用說明書一份
備注說明除非另有要求,運輸完成并準備使用帶有可更換尖端的1/2“(13 mm)探頭,**工具包和使用手冊。**處理含有機溶劑或低表面張力液體的樣品時,請勿使用具有可更換尖端的探頭。使用固體探頭零件號630-0219。除非另有要求,所提供的探頭將具有可更換的尖端。
謹慎所有的探測器,包括那些有可替換的尖端的探測器,都能在20khz共振。如果可替換的提示被刪除或刪除與探測器的其余部分分離,這個元素將不再共振20千赫,而電源將進入一個過載條件,關閉或失敗。有機溶劑(如。和低表面張力液體穿透探測器和可更換的尖端之間的接口,從而將微粒帶進螺紋部分并將尖端從探針中分離出來。當處理含有有機溶劑或低表面張力的樣品時液體,總是使用固體探測器或作為一個備用的全波10(254毫米)探測器或擴展器。





細胞破碎的方法:

一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。

1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。

2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。

二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。

1:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。

機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關,空化現象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。

超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。

2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環狀隙噴射到靜止的撞擊環上,被迫改變方向經出口管流出。此過程中細胞經歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內含物。

這是一種溫和的、徹底破碎細胞的較理想的方法。

3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。

三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變 。

有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。

四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎開來。

細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。

裂解液標準配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內比較好發揮作用) 。

綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質的提取。





使用前注意事項:

1.根據所處理的樣本體積選擇適當探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;

2.AMPLITUDE旋鈕打開時,探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應超過10秒;

3.使用前準備好冰盒,樣品處理時必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。



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